【前言简介】
FIV猫免疫缺陷病毒试剂盒的底物载玻片由含有固定的猫肾细胞（克兰德尔）的特氟隆掩蔽孔组成，其中约7-15%感染了猫免疫缺陷病毒，并含有特有的细胞质荧光。将猫血清用缓冲盐水稀释，并在单个载玻片孔中孵育，以允许血清抗体与固定抗原发生反应。然后清洗载玻片以去除无反应性的血清蛋白，并加入荧光标记的抗猫IgG（偶联物）。这种偶联物允许有时间与抗原-抗体复合物发生反应。再次清洗载玻片以去除非反应性的共轭物。由此得到的反应可以用标准的荧光显微镜观察到，在每个区域的7-15%的细胞中，阳性反应被视为相当均匀的苹果绿细胞质荧光。阴性反应为红色染色细胞或荧光。
【检测原理】
利用间接荧光免疫分析法的原理进行检测。
【FIV猫免疫缺陷病毒的试剂盒组成成分】
1） 基质载玻片
2） FITC标记的羊抗人IgG
3） 阳性对照
4） 阴性对照
5） 封固剂
6） PBS
所需材料（未提供）
1) 蒸馏水或去离子水
2) 250或500ml的PBS洗瓶
3) 人工制备血清稀释液的试管或微孔板
4) 精密移液管
5) 24x50mm玻璃罩
6) 荧光显微镜（最大激发波长为490nm，平均发射波长530nm）和200倍放大系统
7) 37℃水浴锅或培养箱
8) 用于孵化的湿度室
【FIV猫免疫缺陷病毒试剂盒的储存条件】
所有试剂盒组件应存储在2-8°C。在打开试剂之前，将其置至室温（20°-25°C）。
检测步骤
1) 对所有未检测的患者血清标本准备1：10的筛查稀释液（1份患者血清和9份PBS）。
2) 准备阳性对照的稀释液，包括规定终点以上1的稀释和以下1的稀释(即1:40-1:160)。
3) 每检测一次血清稀释液，每孔加入15μL（1小滴），记录位置供以后参考。每次试验包括阴性对照和步骤2中制备的阳性对照稀释液。
4) 将载玻片放入湿度室，在37º±0.5ºC下孵育30分钟。
5) 在培养箱或水浴锅中除去湿度。用洗涤瓶中温和的PBS冲洗三次，每次都放入水槽中。重复这个步骤3次，不允许孔干燥。
6) 每个载玻片加入15-20μL偶联物（一小滴），然后将载玻片放回湿度室，在37º±0.5ºC下孵育30分钟。应在黑暗中孵育，以保护光敏共轭物。
7) 按照上面的步骤5所述，清洗和干燥载玻片。
8) 在每个载玻片上加入3-4滴封固剂，并将盖子放置在测试片上。
9) 在配备适当的荧光显微镜上以400倍的放大倍数下读取每孔，并与阳性和阴性对照孔的视觉强度和外观进行比较。载玻片可以在2-8ºC的黑暗中保存24小时。
【结果解释】
阳性反应仅在受感染的细胞中表现为相当均匀的胞质荧光。荧光的大小、外观和密度必须与阳性对照和阴性对照反应进行比较。不同于阳性对照的反应性模式必须被认为是非特殊的。
患者标本
1：10呈阳性：IgG滴度为1：10及以上报告为感染，除非猫已经接种了FIV疫苗。
1：10时为阴性：报告FIV抗体为阴性。
【局限性】
该试验不能区分野生型感染和疫苗接种后的反应。
更多FIV猫免疫缺陷病毒试剂盒详细信息，请致电400免费热线垂询，科润达生物，助力健康守护！
