【前言简介】
碳青霉烯酶产生生物（CPO），更具体地说，产碳青霉烯酶肠杆菌科（CPE）是世界范围内一个主要的公共卫生问题，因为它们对抗生素具有广泛的耐药性，除了碳青霉烯类外，还有大多数抗菌药物，因此管理感染患者的选择很少。除了CPE，CPOs还包括非发酵革兰氏阴性杆菌（NFGNB），如铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌，它们不仅对内酰胺和其他抗生素有耐药性，而且对碳青霉烯类也有耐药性。CPOs和编码这些耐药性的基因的迅速传播已经导致了欧洲几个国家以及世界其他地方的医院暴发和流行情况。金属β-内酰胺酶（MBL）、广谱β-内酰胺酶（ESBL）和AmpCβ-内酰胺酶是β-内酰胺酶家族的一部分。IMP型MBL主要在亚洲国家的革兰氏阴性菌中检测到，尽管目前在欧洲以及北美和北美和南美的一些地区的流行率也在增加。B类IMP型是一种质粒介导的碳青霉烯酶，由于它们不仅能降解C3G，还能降解碳青霉烯类抗菌药物，因此应该被认为是一个主要的潜在问题。基于抑制剂的表型验证试验存在于A类（KPC）和B类（VIM，IMP，NDM）碳青霉烯酶，目前，IMP的最终确认依赖于分子分析。这些测试费用昂贵，只能在专门的环境中由熟练的人员进行，因此限制了它们更广泛的使用。国际专家和卫生当局认为，开发新的快速诊断试验以跟踪抗菌素耐药性模式是优先的核心行动之一。
本试剂盒是Coris公司抵抗系列抗菌素耐药性诊断检测的一部分。
【检测原理】
本试剂盒是基于胶体金纳米颗粒膜技术的即用型检测试剂盒，可用于检测肠杆菌科或NFGNB单个菌落分离物中的IMP碳青霉烯酶。
使用一种直接针对IMP碳青霉烯酶的一个表位的单克隆抗体对硝酸纤维素膜致敏，另一种直接针对IMP碳青霉烯酶第二表位的单克隆抗体与胶体金纳米颗粒共轭并在膜上干燥。
本试验目的是检测琼脂培养皿上生长的肠杆菌科或非发酵革兰阴性杆菌菌落分离物中的IMP样碳青霉烯酶。
当含有重悬细菌的缓冲液与膜接触时，溶解的共轭物通过被动扩散与样本迁移，共轭物和样本材料都接触到吸附在硝酸纤维素膜上的抗IMP抗体。若样本中含有IMP碳青霉烯酶，则由共轭物-IMP复合物继续与吸附在硝酸纤维素膜上的抗IMP抗体结合。15分钟内根据检测卡上的红色线条读取结果。溶液继续迁移到达质控线与质控共轭物结合生成第二条红线。
【样品收集及处理】
待测标本应采用标准的微生物学方法来获得和处理。
确保样品没有用含有甲醛或其衍生物的溶液进行处理。
【准备工作】
检测前，将试剂盒所有组分和样本（含有待测菌落的培养皿储存在4℃下）平衡至室温（15-30℃），打开检测卡包装袋并取出检测卡，立即进行检测，需标记患者名字或样本编号（一个样本以个检测卡）
样品准备：
关于除细菌菌落以外的样品类型的性能声明尚未建立。对于细菌菌落，我们建议使用新鲜的菌落来获得最佳的测试性能。
1）准备一支半刚性试管并加入10滴LY-A缓冲液
2）用一次性细菌接种环取1个菌落，并将细菌接种环浸入含有缓冲液的收集管底部，以收集细菌
3）在取出细菌接种环之前彻底搅拌混匀
4）将滴管插入试管中并涡旋均质化
5）滴加3滴稀释后的样本至检测卡样本孔中，或者，用微量移液器吸取100µL稀释后的样本并加入检测卡上的样本孔中
6）等待反应15分钟后读取结果
