【前言简介】
碳青霉烯酶产生生物（CPO），特别是耐碳青霉烯肠杆菌科（CRE）是世界范围内的一个主要公共卫生问题，因为它们具有广泛的耐药性，还包括碳青霉烯类大多数抗菌药物，因此对管理感染患者的选择很少。除了CRE外，CPOs还包括非发酵革兰氏阴性杆菌（NFGNB），如铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌，它们不仅对内酰胺和其他抗生素有耐药性，而且对碳青霉烯类也有耐药性。CPOs或编码这些耐药性的基因的迅速传播已经导致了欧洲和世界其他地方的一些国家的医院暴发和流行情况。国际专家和卫生当局认为，开发新的快速诊断试验以跟踪抗菌素耐药性模式是优先的核心行动之一。NDM和KPC是许多国家中最增长和最流行的两种碳青霉烯酶。另一方面，D类OXA-48型碳青霉烯酶是临床实验室检测的最具挑战性的耐药性机制。快速识别这些碳青霉烯酶对于改善患者的治疗和控制这类抗生素耐药性在医院中的传播至关重要。使用特定抑制剂组合盘的验证性表型试验已经存在，用于检测选定类型的碳青霉烯酶，包括A类（KPC）和B类（VIM，IMP，NDM）碳青霉烯酶；然而，这些测试很耗时，在抗菌药物敏感性测试结果后需要额外的一天。此外，表型比色法在某些情况下对检测低水平表达的碳青霉烯酶，如OXA-48不够敏感。几种基于不同格式的分子分析方法也允许检测碳青霉烯酶。这些测试费用昂贵，只能在专门的环境中由熟练的人员进行，因此限制了它们更广泛的使用。
【检测原理】
本试剂盒是基于胶体金纳米颗粒膜技术的即用型检测试剂盒，可用于检测肠杆菌科或NFGNB单个菌落分离物中的碳青霉烯酶。
鉴定OXA-48、KPC、NDM：对硝酸纤维素膜致敏：
1）一种直接针对OXA-48碳青霉烯酶和其变体（除了OXA-163样酶之外）的单克隆抗体（O线）
2）一种直接针对KPC碳青霉烯酶的单克隆抗体（K线）
3）一种直接针对NDM碳青霉烯酶的单克隆抗体（N线）
4）一种质控捕获试剂（顶部C线）
四种不同的胶体金纳米颗粒共轭物在膜上干燥：一种直接针对OXA-48碳青霉烯酶第二表位的共轭物、一种直接针对KPC碳青霉烯酶第二表位的共轭物、对NDM碳青霉烯酶特异的第三种共轭物和和用于验证检测条件的质控共轭物。
当含有重悬细菌的缓冲液与膜接触时，溶解的共轭物通过被动扩散与样本迁移，共轭物和样本材料都接触到吸附在硝酸纤维素膜上的固定抗体。若样本中含有OXA-48、KPC或NDM碳青霉烯酶，则由共轭物和OXA-48、KPC或NDM构成的各自复合物将与它们各自的特异线结合（OXA-48：O线；KPC：K线；NDM：N线）。通过被动扩散继续迁移，共轭物和样本材料都到达质控线并与质控共轭物结合（C线），并生成一条红线。15分钟内根据检测卡上的红线读取结果。
【试剂盒组成成分】
1）RESIST-3 O.K.N.检测卡： 20x，检测卡，单独包装
2）LY-D缓冲液： 7mL，含Tris、叠氮化钠（＜0.1%）和洗涤剂，pH7.5的盐溶液
3）一次性收集管： 20x
4）一次性移液管： 20x
5）使用说明书： 1x
需单独订购的材料：
1）RESIST-BC（S-1001）：血培养试剂盒
2）ReSCape（S-1002）：直肠拭子培养试剂盒
【储存】
未开封的试剂盒应储存在4-30℃下，可储存至有效期；一旦打开检测卡包装袋，必须立即进行检测；避免冷冻检测卡缓冲液
【样品收集及处理】
待测标本应采用标准的微生物学方法来获得和处理。
确保样品没有用含有甲醛或其衍生物的溶液进行处理。
【准备工作】
检测前，将试剂盒所有组分和样本（含有待测菌落的培养皿储存在4℃下）平衡至室温（15-30℃），打开检测卡包装袋并取出检测卡，立即进行检测，需标记患者名字或样本编号（一个样本以个检测卡）
样品准备：
已经建立直肠拭子和血液培养中除菌落以外的样本类型的性能声明。对于直肠拭子和血培养，根据各自试剂盒的说明书进行操作（S-1002：ReSCape；S-1001：RESIST-BC）。对于细菌菌落，我们建议使用新鲜的菌落来获得最佳的测试性能。
1）准备一支收集管并加入11滴LY-D缓冲液
2）用一次性细菌接种环取3个菌落，并将细菌接种环浸入含有缓冲液的收集管底部，以收集细菌
3）在取出细菌接种环之前彻底搅拌混匀
4）封闭并涡旋均质化
5）使用移液管吸取100µL稀释后的样本并加入检测卡上的样本孔中（稀释后的样本必须达到移液管上显示的黑线，才能准确地抽吸100μL ）
6）等待反应15分钟后读取结果
当检测线和质控线可见时，可以更早地报告阳性结果。在超过反应时间后，不要考虑新线的出现。结果必须在仍然湿的检测卡上读取。
更多产品细节和技术信息，欢迎致电400热线咨询客服人员，将获得我们真诚的服务！
