伤寒斑疹立克次体出现在全球范围内,并且通过受到感染的跳蚤进行传播。人体受感染后会诱导产生出特异性的抗体回应,产生的特异性抗体是可以被检测到的,因此可以被当做一种间接的检测手法来诊断受感染的人群。
检测原理:
试剂盒微孔板中包被有从伤寒斑疹立克次体中纯化出的外膜蛋白(rOmp B)。患者血清首先在IgM血清制剂中以1:10稀释,其将IgG和类风湿因子复合物聚集,然后在样品稀释液中进一步10倍稀释。然后将最终的1:100血清稀释液在包被的微孔中温育以使血清抗体与固相抗原结合。然后洗涤微孔以除去未反应的血清蛋白,并加入酶标记的抗人IgM(Enzyme Conjugate)以标记结合的抗体。在孵育后,洗涤微孔以除去未结合的酶缀合物。然后加入酶底物(TMB底物)反应,形成蓝色,颜色强度与血清样本中抗体的量成正比。定时反应后,加入终止液终止反应,颜色变黄,在微量滴定板读数器或分光光度计上在450nm的波长下测量吸光度。
【试剂盒成分】
微孔板
包被有纯化的伤寒立克次体外膜蛋白(rOmp B),即用型
IgM血清制剂
含有羊抗人IgG(Fc(γ)特异性)的缓冲液,即用型
样品稀释液
含牛血清蛋白及吐温20的PBS缓冲液 即用型
酶联物
辣根过氧化物酶标记的抗人IgM(特异性u链) 即用型 避光保存
阳性质控
临界质控
阴性质控
底物液
琥珀色瓶,含TMB底物液以及双氧水 即用型 避光保存
终止液
含稀释好的硫酸 即用型 避免接触皮肤
PBS缓冲液
将试剂盒提供的小包加入到1L蒸馏水中,充分混匀, 以配置PBS缓冲液