【前言简介】
登革热病毒是一种直径约50nm的单链RNA病毒,属于黄病毒属。登革热和登革热出血热由四种密切相关但抗原不同的病毒血清型(DEN-1、DEN-2、DEN-3和DEN-4)之一引起。感染其中一种血清型不会提供交叉保护性免疫,因此生活在登革热流行区的人一生中可能会感染四次登革热。这些病毒是由埃及伊蚊传播的,埃及伊蚊是一种喜欢以人类为食的间活动的居家叮咬蚊子。感染登革热病毒会产生一系列临床疾病。从非特异性病毒综合征到严重和致命的出血性疾病。它主要是热带地区的一种疾病;其全球分布与疟疾相当,估计有25亿人生活在有传染病风险的地区全球估计有5000万至1亿例登革热病例和几十万例登革出血热病例。
(1)在大多数国家,DHF的病死率约为5%;大多数致命病例发生在儿童和年轻人中。
(2)DHF的重要危险因素包括感染病毒的毒株和血清型,以及患者的年龄、免疫状态和遗传倾向。
(3)风险群体:热带城市地区的居民或游客。
【检测原理】
特异性抗体的定性免疫酶学测定是基于ELISA(酶联免疫吸附试验)技术。微孔板上包被特定的抗原,以结合样品的相应抗体。洗涤微孔以去除所有未结合的样品材料后,添加酶联物,与捕获的抗体结合。在第二个洗涤步骤中,未结合的共轭物被去除。通过加入四甲基联苯胺(TMB)底物,得到蓝色反应产物,可以观察到结合结合物形成的免疫复合物。该产品的强度与样品中特异性抗体的数量成正比。加入终止液以终止反应,蓝色变成了黄色。使用酶标仪器读取450/620nm处的吸光度。
【试剂盒组成】
1)微孔板 12x8
2)样品稀释液 1×100ml,pH 7.2 ± 0.2,即用型
3)终止液 1×15ml,即用型
4)洗涤浓缩液 20倍浓缩,1×50ml,pH 7.2 ± 0.2
5)酶联物 1×20ml,即用型
6)底物液 1×15ml,即用型
7)阳性质控 1×2ml,即用型
8)临界质控 1×3ml,即用型
9)阴性质控 1×2ml,即用型
10)封板纸 1x
11)使用说明书 1x
12)布局表 1x
【所需的材料和设备】(未提供)
1)酶标仪
2)37℃培养箱
3)手动或自动洗板装置
4)移液器:10和1000µL
5)涡旋混合器
6)蒸馏水
7)一次性试管
【储存条件】
试剂盒必须储存于2-8℃的环境中,打开的试剂在标签上规定的有效期内是稳定的。
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