【前言简介】
副流感病毒感染是一种通过空气传播并在全世界各个地域都会出现的传染病。副流感病毒在1岁大婴儿中的血清学流行率为50%。副流感病毒的典型特征是频繁的再感染,副流感病毒3的主要特征为：其潜伏期为2-6天。副流感病毒是副粘病毒的一个亚种。它和呼吸道合胞病毒(RSV)一起属于呼吸道疾病的主要病毒性病原体，并且这种呼吸道感染会伴随有严重的临床症状。在成年人中，副流感病毒会引起严重的鼻咽炎。副流感病毒感染开始的症状表现为突然间的头疼、肌肉疼痛和关节痛，接下来就出现38-39°C的高烧。如果下感染了下呼吸道，则又会出现气管支气管炎的症状：声音嘶哑和干咳。在新生儿中，副流感病毒1会引起严重的肺炎，主要表现为高烧、黄萎病、呼吸困难和脓血痰。有时候还会出现脑膜炎的症状。在婴儿和儿童中，副流感病毒2经常会引起急性喉气管支气管炎和假格鲁布。它首先表现为鼻黏膜炎的症状，之后出现呼吸困难、干咳和呼吸急促。副流感病毒3被认为是引起肺炎和细支气管炎的主要病原体。副流感病毒1/2/3分布于全球各个地方都存在，而副流感病毒4仅出现在美国。流感病毒1和流感病3的感染一年四季都会出现，而流感2和4的感染只是偶尔出现。副流感病毒的实验室检测方法有血细胞凝集检测、补体结合实验和中和实验。新方法有IFA和ELISA，它们可以鉴别出病人血清中的IgM和IgM抗体。在鉴别诊断中，由于交叉反应，我们必须进行麻疹病毒、船运热病毒和猿病毒5等副粘病毒的检测。
【检测原理】
此固相ELISA试剂盒利用的夹心法原理。包被板上包被了抗原。用对人IgM具有特异性的酶标二抗来检测结合到包被抗原的样品特异性抗体。底物反应后，所显示的颜色强度与检测到的IgM特异性抗体的量成正比。样品的结果可直接使用标准曲线得。
实验步骤
1) 加100µL标准品和已稀释样本于相应反应孔中，在定性检测中只使用标准品B。
2) 封板后室温（18℃-25℃）温育60分钟。
3) 移去粘性金属板，弃去孔中液体。用300µL洗涤液洗板3次，在吸水纸上拍干。
4) 在每一微孔中加入100µL酶联物。
5) 封板后室温（18℃-25℃）温育30分钟。
6) 移去粘性金属板，弃去孔中液体。用300µL洗涤液洗板3次，在吸水纸上拍干。加底物液和终止液时，如果有条件的话，可使用8孔微量移液器。确保底物液和终止液都是相同的时间间隔加入。使用确切容积并避免气泡产生。
7) 每孔加TMB底物液100µL。
8) 室温（18℃-25℃）避光温育20分钟。
9) 在每一微孔中加入100µLTMB终止液以终止底物反应。轻轻摇动包被板以使试剂混合均匀。此时，颜色蓝色变成黄色。
10) 加终止液后60分钟内在450nm处测OD值。
【质量控制】
只有在按照说明执行测试后，测试结果才有效。此外，用户必须严格遵守GLP（良好实验室规范）或类似标准/法律的规定。用户和/或实验室必须具有经过验证的系统才能根据GLP进行诊断。所有标准/控制必须在质量控制证书上规定的可接受范围内。 如果不符合标准，则运行无效且应重复执行。每个实验室应使用已知样品作为进一步控制。建议参加适当的质量评估试验。
如有任何偏差，应证明以下技术问题：（准备好的）试剂的失效日期，储存条件，移液器，装置，培养条件和洗涤方法。
【结果计算】
可以定量或定性地进行测试评估。
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