【检测原理】
实验反应原理可分为以下四个步骤：
1.血清温育：特异性抗体与固相上的抗原结合，形成稳定的免疫复合物。室温下温育60分钟后，用预稀释的洗涤缓冲液洗涤微孔，以除去所有未结合的血清成分。
2.酶联物温育：将抗人IgG/IgM/IgA辣根过氧化物酶标记物加入所有微孔中。酶标记物与固相抗原上的IgG/IgM/IgA抗体结合，形成稳定的夹心复合物。室温下温育30分钟后，用洗涤缓冲液洗涤微孔，以去除未结合的酶联物。
3.底物反应和终止反应：每孔加入TMB底物液，过氧物酶与底物反应形成稳定的蓝色产物。室温下温育20分钟后，每孔加入0.5M H2SO4，反应终止，溶液由蓝色变为黄色。
4.读数和解释：用酶标仪在450nm处（参考波长为600-690nm)测吸光度值，颜色深度（OD值）与样本中的特异性抗体浓度成正比。
【贮存与稳定性】
1.所有试剂应保存在2-8℃下。
2.每瓶试剂的有效期都印在各自的标签上，避免使用过期试剂。
3.稀释洗涤缓冲液贮存在2-8℃下可保存4周。
4.打开后的试剂盒应在三个月内使用。
【样品的采集及处理】
本实验可使用血清或血浆（使用EDTA或肝素抗凝）样品，不要使用溶血﹑脂血﹑黄疸的样品。
样品采集
静脉采血，允许使用凝血，在室温下用离心法分离血清。
样品的储存
血清或血浆样本可在2-8℃下储存3天，对于长时间储存，应置于-20℃下。避免反复冻融样品。
样品的稀释
如样品浓度高于最高标准品的浓度，则需用血清稀释液稀释样品。
使用前，将血清样本用血清稀释液按1：101预稀释（如：5μl的血清+500μl的血清稀释液）。
为避免风湿因子（RF）的干扰，应用RF吸附剂预吸附血清。不要吸附标准品。
