【前言简介】
刚地弓形虫是一种小的胞内寄生虫，其生命周期有有性和无性阶段。性发育仅限于（可能只有）猫的肠道细胞；形成的卵囊被排出体外，由于它们的抗性细胞壁，它们可能在有利的情况下至少感染1年。动物和人类是刚地弓形虫无性增殖的中间宿主：被摄入的寄生虫会在宿主细胞内爆炸性增殖，最终溶解它们。它们通过血液循环和淋巴系统遍布全身，虽然可以感染任何类型的细胞。在肌肉和脑细胞中形成球状囊肿，直径约5-100µm。囊肿在中间宿主中实际上是终身的。刚地弓形虫是人类最常见的寄生虫，但其丰度（7-80%）高度依赖于其地理区域、社会经济地位和营养习惯。感染很少引起弓形虫病，通常没有临床症状，但可能对免疫抑制者和胎儿产生严重的问题。因为只有怀孕期间的原发性感染对未出生的婴儿可能是危险的，甚至是致命的（先天性感染的概率约为50%），因此必须排除最近发生的感染。在98%以上的孕妇病例中，IgM的缺失排除了近期感染的可能性。在新生儿中，抗弓形虫IgM的存在就足以证实先天性弓形虫病，因为母体IgM与IgG不同，不能穿过胎盘屏障。但大量受感染的婴儿没有出现可检测到的IgM水平，因此是假阴性。在免疫抑制的患者中，弓形虫病主要通过早期潜伏感染的重新激活而引起严重的并发症。
【检测原理】
特异性抗体的定性免疫酶学测定是基于ELISA（酶联免疫吸附试验）技术。微孔板上包被特定的抗原，以结合样品的相应抗体。洗涤微孔以去除所有未结合的样品材料后，添加酶联物，与捕获的抗体结合。在第二个洗涤步骤中，未结合的共轭物被去除。通过加入四甲基联苯胺(TMB)底物，得到蓝色反应产物，可以观察到结合结合物形成的免疫复合物。该产品的强度与样品中特异性抗体的数量成正比。加入终止液以终止反应，蓝色变成了黄色。使用酶标仪器读取450/620nm处的吸光度。
【试剂盒组成】
1）微孔板 12x8，包被刚地弓形虫抗原
2）样品稀释液 1×100ml，磷酸盐缓冲液（10mM），pH 7.2 ± 0.2，即用型
3）终止液 1×15ml，硫酸，0.2mol/L，即用型
4）洗涤浓缩液 20倍浓缩，磷酸盐缓冲液（0.2M），1×50ml，pH 7.2 ± 0.2
5）酶联物 1×20ml，过氧化物酶标记的人抗体，即用型
6）底物液 1×15ml，3,3’,5,5’-四甲基联苯胺（TMB），即用型
7）阳性质控品 1x2ml
8）临界值质控品 1x3ml
9）阴性质控品 1x2ml
10）封板纸 1x
11）使用说明书 1x
【所需的材料和设备】（未提供）
1）酶标仪
2）37℃培养箱
3）手动或自动洗板装置
4）移液器：10-1000µL
5）涡旋混合器
6）蒸馏水
7）一次性试管
【储存条件】
试剂盒必须储存于2-8℃的环境中，打开的试剂在标签上规定的有效期内是稳定的。
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