【前言简介】
人绒毛膜促性腺激素（hCG）是一种糖蛋白激素，在妊娠期间它主要由胎盘分泌。怀孕后hCG浓度迅速升高,约在早孕期末达到高峰。整个孕期均呈高浓度,分娩后,HCG水平迅速降低,几天后几乎检测不到。
在结构上,完整的HCG分子由α和β两个亚单位组成,α亚单位和其它糖蛋白的α亚单位几乎相同。如:甲状腺激素(TSH),黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH),各个激素β亚单位的区别造成它们生物学的特性和免疫化学的不同。单克隆抗体识别HCG分子β链上唯一位点，这对于区分HCG和LH、FSH和TSH是必要的。HCG的检测可用于怀孕的早期检测。
1) 妊娠期间，除hCG浓度会升高外，高浓度的hCG还可能伴随有滋养层癌和滋养层源性疾病，如：葡萄胎，绒毛膜上皮癌，胚胎癌及其它疾病。
2) 在不同的睾丸肿瘤中，hCG的浓度通常也会升高，因此HCG联同AFP可作为睾丸肿瘤检测的肿瘤标记物。HCG水平的变化与肿瘤治疗效果有很大的关系。
3) 在临床或超声波都检测不到睾丸不正常的情况下，外生殖性生殖细胞癌还是可以被检测到的。50%以上恶性胰岛瘤患者的hCG水平都会升高：在其他良性肿瘤中，hCG都检测不到。一小部分胰腺癌患者的hCG也会出现异常分泌，如：卵巢癌，膀胱癌，胃癌和小岛细胞癌。
【检测原理】
DRG公司的HCG ELISA试剂盒是一种基于夹心法的酶联免疫吸附试剂盒。反应板上的微检测孔包被有能结合hCG分子上独特抗原位点的单克隆抗体。将一份含有内源性hCG的病人样本在包被孔中与酶联物进行孵育，该酶联物是一种联结有辣根过氧化物酶的抗hCG α链的单克隆抗体。孵育后，用洗涤液洗去未结合的酶联物。过氧化物的结合量与样本中hCG的浓度成正比例。加入底物溶液后，显出的颜色强度与病人样品中hCG的浓度成正比。
【试剂盒组成成分】
1) 微孔板,12×8(可拆)板条，96孔，微孔中包被抗β-HCG抗体（单克隆抗体）
2) 标准品(标准品1-5),5支(冻干)，1.0ml
浓度:5;50;200;500;1000mIU/ml，
转换系数：1pg/ml=0.00916mIU/ml。内含0.3%的Proclin防腐剂，0.015%BND和0.010%MIT 作为防腐剂。
3) 样品稀释液，1支，10ml，即用，0mIU/ml，含0.03%的Proclin，0.015%BND和0.010%MIT作为防腐剂。
4) 酶联物，1支，11ml，即用，辣根过氧酶标记的抗α亚单位的单抗，含0.03%的Proclin，0.015%BND和0.010%MIT作为防腐剂。
5) 底物液，1支，14ml，即用，内含TMB底物液。
6) 终止液，1支，14ml，即用，内含0.5M的H2SO4，避免接触终止液，以免刺激或灼烧皮肤。
注意：用于样本稀释的零标准品应视需要而定。
实验所需器材（但试剂盒不提供）
1) 酶标仪（450±10nm）（例如：DRG公司的微孔板读数仪）
2) 标准移液器
3) 吸水纸
4) 蒸馏水
5) 计时器
6) 坐标纸或数据处理软件
【检测方法】
实验开始前必须将所有的试剂和所需数目的板条都平衡至室温。
标准品
在含冻干成分的标准品瓶内加入1.0ml蒸馏水。注意：重新配置好的标准品可在2-8℃的环境下稳定存放2个月，如果冻存于-20℃的环境下则可存放更长时间。
检测步骤
每一次检测都应建立一标准曲线。
注意：孕妇血清必须在实验开始前稀释100倍。
1）将所需数目的板条置于板架上。
2）用一次性吸嘴将标准品﹑质控品和样品分别25μL加入相应的检测孔中。
3）每孔加入100μL酶联物。
4）混合10秒，在一步中充分混合非常重要。
5）室温下温育30分钟。
6）快速弃去检测孔中的内含物，每孔用400μL洗涤液洗板5次，在吸水纸上拍干以除去残余液体。
特别注意：洗板步骤是否正确操作会明显影响实验的灵敏度和精确度
7）每孔加入100μL底物液。
8）在室温下温育10分钟。
9）每孔加入50μL终止液以终止酶反应。
10）在加终止液后10分钟内于450±10nm处读取OD值。
