【前言简介】
汉坦病毒是布尼亚病毒科的负义RNA病毒。人类可能通过尿液、唾液或接触啮齿动物排泄物感染汉坦病毒。一些汉坦病毒可能导致严重的人类疾病,如肾综合征出血热(HFRS)和汉坦病毒肺综合征(HPS)。人类感染汉坦病毒几乎完全与人类接触啮齿动物粪便有关,但最近在南美洲发现了安第斯病毒人传人的报告。汉坦病毒在人类中的潜伏期为两到四周,然后才会出现感染症状。HFRS症状可分为五个阶段:发热期:症状包括发烧、发冷、手心出汗、腹泻、不适、头痛、恶心、腹痛和背痛、呼吸道问题,如流感病毒感染常见的呼吸道问题,以及胃肠道问题。这些症状通常会出现3-7天,并在暴露后大约两到三周出现。低血压期:当血小板水平下降,症状可能导致心动过速和低氧血症时,就会出现这种情况。这个阶段可以持续2天。少尿期:这一阶段持续3-7天,其特征是出现肾衰竭和蛋白尿。多尿期:其特点是每天利尿3-6升,可以持续几天到几周。恢复期:这通常是在恢复和症状开始改善时发生的。受HFRS特别影响的地区包括中国、朝鲜半岛、俄罗斯(汉坦病毒、普乌马拉病毒和汉城病毒)以及北欧和西欧(普乌马拉病毒和多布拉瓦病毒)。
【检测原理】
特异性抗体的定性免疫酶学测定是基于ELISA(酶联免疫吸附试验)技术。微孔板上包被特定的抗原,以结合样品的相应抗体。洗涤微孔以去除所有未结合的样品材料后,添加酶联物(HRP),与捕获的抗体结合。在第二个洗涤步骤中,未结合的共轭物被去除。通过加入四甲基联苯胺(TMB)底物,得到蓝色反应产物,可以观察到结合结合物形成的免疫复合物。该产品的强度与样品中特异性抗体的数量成正比。加入终止液以终止反应,蓝色变成了黄色。使用酶标仪器读取450/620nm处的吸光度。
【试剂盒组成】
1)微孔板 12x8,包被重组汉坦病毒抗原
2)样品稀释液 1×100ml,磷酸盐缓冲液(10mM),pH 7.2±0.2,即用型
3)终止液 1×15ml,硫酸,0.2mol/L,即用型
4)洗涤浓缩液 20倍浓缩,磷酸盐缓冲液(0.2M),1×50ml,pH 7.2±0.2
5)酶联物 1×20ml,过氧化物酶标记的人IgG抗体,即用型
6)底物液 1×15ml,3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB),即用型
7)阳性质控 1×2ml,即用型
8)临界质控 1×3ml,即用型
9)阴性质控 1×2ml,即用型
10)封板纸 1x
11)使用说明书 1x
【所需的材料和设备】(未提供)
1)酶标仪
2)37℃培养箱
3)手动或自动洗板装置
4)移液器:10-1000µL
5)涡旋混合器
6)蒸馏水
7)一次性试管
【储存条件】
试剂盒必须储存于2-8℃的环境中,打开的试剂在标签上规定的有效期内是稳定的。
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