甲型肝炎在过去称为黄疸型肝炎或传染性肝炎,早在公元8世纪我国中医书籍中就有“黄疸”的记载,但其病原体( HAV)直到1979年才分离培养成功。该病原体一般通过消化道传播,发病以学龄前儿童发病率最高,青年人次之, 近年来,由于疫苗注射及卫生条件改善,发病年龄也见有后移现象,即成年人有增多趋势。通过水源或食物传播,也可引起甲型肝炎流行。
【甲型肝炎IgG试剂盒检测原理】
该酶联免疫检测试剂盒是基于竞争法原理。样品中的甲型肝炎 IgG抗体与HRP标记的单克隆甲型肝炎 IgG抗体竞争与微孔中包被的HAV重组抗原相结合。洗板洗去未结合部分,加入显色剂孵育后产生颜色,之后加入硫酸终止反应。颜色的深度与样品中甲肝抗体含量成正比。
【甲型肝炎IgG试剂盒检测方法】
检测开始前,将试剂盒平衡到室温(18-30℃)。蒸馏水1:30对浓缩洗涤液进行稀释。
1. 分别加入100μl/孔已稀释样品、阴性质控、阳性质控。
2. 盖板37℃反应45分钟。
3. 300μl/孔洗涤液洗涤5次,拍干。
4. 加入50μl/孔酶联物
5. 37℃反应30分钟
6. 300μl/孔洗涤液洗涤5次,拍干。
7. 加入100μl/孔TMB底物溶液,室温孵育10分钟。
8. 加入50μl/孔终止液
9. 吸光度检测:在450nm处酶标仪读数(加终止液终止反应后5分钟内)
【结果计算】
质控范围
在450nm处,阳性质控的平均OD值-阴性质控的平均OD值应>0.300。
如果没有,则结果无效,需重复。
临界值(Cut off Value)计算
临界值=0.1+阴性质控的平均OD值
如果阴性质控的平均OD值<0.050,则临界值=0.100+0.050=0.150
结果说明
阴性结果:样品OD/临界OD<临界OD ,说明没有检测到甲型肝炎病毒IgG抗体
阳性结果:样品OD/临界OD≥临界OD ,说明患者可能感染过甲型肝炎病毒。