【临床背景】
风湿性关节炎（RA）是最常见的系统性自身免疫疾病之一。RF是IgG类抗体定向的免疫球蛋白恒定区。主要以IgM抗体存在，同时也存在IgA或IgG。
RA患者血清中有70-80%的RF，但对RA并不具有特异性，因为在健康人体内也存在。发生率取决于年龄：年轻人只有1-4%，老人可达到25%。
与类风湿因子单独检测相比较，环瓜胺酸肽抗体（CCP抗体）对RA的诊断具有更高的灵敏度和特异性。抗CCP抗体在疾病早期就可发现，而且对疾病的发展具有很高的预测价值。
【实验原理】
第一步中样本中的环瓜胺酸肽抗体CCP抗体结合包被板上包被的抗瓜氨酸合成肽，室温孵育60分钟后洗去未结合的成分，接下来加入的是HRP-抗人IgG，与第一步中的结合抗体连接，室温孵育30分钟，洗板。TMB底物液加入，产生蓝色，孵育15分钟后加酸终止反应，颜色由蓝色变为黄色，30min内450/620nm处检测吸光值，OD值与几何抗体的量成正比例关系。
【贮存和稳定性】
打开密封的包被板之前先让其平衡至室温，大约30min，未用的板条放回原装袋内，防潮，贮存于冰箱内，可保存8周
HRP-抗人IgG溶液开封后在2-8℃下可保存8周。避免底物液曝光，各成分的效期见相应的标签，或见外盒包装。收货后所有试剂都保存在2-8℃
【样本采集和贮存】
血清，血浆
【实验步骤】
1. 加100ul的标准品，质控品和稀释样本于相应孔内
2. 盖板，室温（18*25℃）孵育60min
3. 弃去反应液，每孔加300ul洗涤液洗板3次
4. 每孔加100ul的酶联物
5. 盖板，室温孵育30min
6. 弃去反应液，每孔加300ul洗涤液洗板3次
7. 如果有条件的话，建议底物液和终止液的加入用8通道加样器，确保加样时间一致
8. 每孔加100ul的TMB底物液，短暂振荡
9. 避光，室温孵育15min
10. 每孔加100ul的TMB终止液，轻轻混匀
11. 30min内酶标仪上450nm处检测
【结果说明】
以标准品1-5的OD值为Y轴，浓度为X轴，建立标准曲线，质控和未知样本的浓度可直接从标准曲线上读取
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