【前言简介】
圆线虫是一个属,包含大约50种专性胃肠道寄生虫。肠类圆线虫是一种引起圆线虫病的人类寄生虫的学名。肠类圆线虫可以寄生于人类。成虫寄生期生活在小肠黏膜的隧道中。肠类可在热带和亚热带地区发现,但也发生在温带地区,更常见的是农村地区。在土壤或水的粪便污染很少的社会中,肠类圆线虫的发病率非常低。许多感染者一开始通常无症状。症状包括皮炎:肿胀、瘙痒、幼虫出现和皮肤被穿透部位的轻微出血。如果寄生虫到达肺部,胸部可能会感觉像是在灼烧,并可能导致喘息和咳嗽,并伴有类似肺炎的症状(洛弗勒氏综合征)。肠道最终会被侵入,导致烧灼痛、组织损伤、败血症和溃疡。在严重的情况下,水肿可能导致肠道梗阻,以及蠕动收缩的丧失。在免疫功能低下的个体中,圆线虫感染(特别是在使用类固醇后,例如移植手术后)可导致播散性圆线虫病,即蠕虫超越肠道进入其他器官。
【检测原理】
特异性抗体的定性免疫酶学测定是基于ELISA(酶联免疫吸附试验)技术。微孔板包被有特定的抗原以结合样品的相应抗体。在洗板以去除所有未结合的样品材料后,添加酶联物,与捕获的抗体结合。在第二个洗涤步骤中,未结合的共轭物被去除。通过加入四甲基联苯胺(TMB)底物,得到蓝色反应产物,可以观察到结合结合物形成的免疫复合物。该产物的颜色强度与样品中特异性抗体的数量成正比。加入终止液以终止反应,蓝色变成了黄色。使用酶标仪读取450/620nm处的吸光度。
【试剂盒组成成分】
1) 微孔板 96孔,包被重组类圆线虫抗原
2) 样品稀释液 1x100 mL,磷酸盐缓冲液(10mM),pH 7.2 ± 0.2,即用型
3) 阳性质控 1x2 mL,即用型
4) 临界质控 1x3 mL,即用型
5) 阴性质控 1x2 mL,即用型
6) 底物液 1x15 mL,3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB),即用型
7) 终止液 1x15 mL,硫酸,0.2mol/L,即用型
8) 洗涤浓缩液 20倍浓缩,磷酸盐缓冲液(0.2M),1x50 mL,pH 7.2 ± 0.2
9) 酶联物 1x20 mL,过氧化酶标记的蛋白A/G,即用型
10)封板纸 1x
11)使用说明书 1x
所需材料(未提供)
1) 酶标仪
2) 移液器:10µL-1000µL
3) 一次性试管
4) 手动或自动洗板装置
5) 蒸馏水
6) 涡旋混合器
7) 37℃培养箱
【试剂盒保存】
当在2℃到8℃下储存时,未打开的试剂将保持其稳定性直到有效期。在此日期之后请勿使用试剂。
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