背景说明:
IFNγ,也称为 II 型干扰素,是一种同源二聚体糖蛋白,含有大约 21 至 24 kD 亚基。 位于第 12 号染色体上的人类 IFNγ 基因包含三个内含子; 四个外显子编码 166 个氨基酸的多肽,其中 20 个构成信号肽。与可在任何细胞中发生的 IFNα 和 IFNβ 合成相反,IFNγ 的产生是 T 细胞和 NK 细胞的功能。 所有 IFNγ 诱导剂都以多克隆(有丝分裂原或抗体)或以克隆限制的抗原特异性方式激活 T 细胞。
检测原理:
将抗人干扰素γ抗体包被在微孔板上。样品或标准品中存在的人干扰素γ与吸附在微孔中的抗体结合。孵育后,在洗涤步骤中去除未结合的生物成分,并添加生物素缀合的抗人干扰素γ抗体,并与第一抗体捕获的人干扰素γ结合。温育后,未结合的生物素缀合的抗人干扰素γ抗体在洗涤步骤中被去除。 添加链霉抗生物素蛋白HRP 并与生物素缀合的抗人干扰素γ抗体结合。孵育后,在洗涤步骤中去除未结合的链霉亲和素 HRP,并将与 HRP反应的底物溶液添加到孔中。与样品或标准中存在的人干扰素γ的量成比例地形成有色产物。通过添加酸终止反应并在 450 nm 处测量吸光度。从7种人干扰素γ标准稀释液制备标准曲线并确定人干扰素γ样品浓度。
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