神经丝轻链蛋白:
人非诊断学(神经丝轻链蛋白)分析是一种酶免疫分析,设计用于定量测定人脑脊液中的神经丝轻链蛋白。该试验使用两种高度特异性非竞争性单克隆抗体(Norgren等人,2002年)。
神经丝是神经元细胞中的主要细胞骨架成分。它们对维持轴突口径和形态完整性很重要,这会影响神经传导的速度和保真度。存在三种不同的神经丝链,根据其大小命名。它们分别是轻、中、重的神经丝。神经丝轻链蛋白构成重链共同组装的主干,形成神经丝纤维(Lee等人,1993)。
检测原理:
该方法是一种2位点固相夹心酶联免疫吸附试验。一种特异性单克隆抗体包被在固体表面上并结合神经丝轻链蛋白。用另一种特异性结合单克隆抗体进行检测。定量测定是通过将无色底物酶转化为有色产品来进行的,有色产品对应于样品中的神经丝轻链蛋白的量。
检测步骤
所有分析试剂应在使用前置于室温。
每次清洗循环后,应将盘子与吸水纸擦干。以800转/分的转速搅动制动盘非常重要。
1. 用等量(1+1)样品稀释剂(SAMDIL)稀释CSF样品,使其总最小体积达到210μl。根据标准稀释表重新配制和稀释的标准品可随时使用(即不应进一步稀释)。
2. 用洗涤缓冲液(3x300μl)清洗要使用的孔。在下一个洗涤周期之前,可以通过敲击吸收材料的板来吸出或去除添加的洗涤缓冲液。
3. 每种标准品加100μL,一式两份。在室温(20-25℃)下温育1小时。
4. 用洗涤缓冲液(3x300μl)清洗孔。
5. 向每个孔中添加100μl新鲜稀释的示踪抗体。在室温(20-25℃)下温育45分钟。
6. 用洗涤缓冲液(3x300μl)清洗孔。
7. 向每个孔中添加100μl新稀释的酶联物。在室温(20-25℃)下温育30分钟。
8. 用洗涤缓冲液(3x300μl)清洗孔。
9. 在每口孔中加入100μl TMB。在室温(20-25℃)下温育15分钟。
10. 向每个孔中添加50μl的终止液,并读取450nm(参考波长620-650nm)处的吸光度。
注意:终止液含有稀释硫酸,具有腐蚀性。
警告和注意事项
1. 仅供研究使用。仅供专业人士使用。
2. 开始分析前,请仔细阅读使用说明。使用试剂盒随附的软件包插件的有效版本。确保一切都被理解。
3. 如果试剂盒包装严重损坏,请在收到试剂盒后一周内以书面形式与供应商联系。不要使用损坏的部件。请将损坏的部件存放起来,以解决与投诉相关的问题。
4. 不要混合不同批次的试剂。不要使用过期的试剂。
5. 制备酶联物液时,请使用提供的15ml sarstedt管(62.554.502)。
6. 建议使用样品、质控品和标准品,一式两份。如果样品之间出现较大偏差,请重新分析。
7. 遵循良好的实验室实践和安全指南。必要时,穿戴实验室外套、一次性手套和防护眼镜。
8. 避免接触终止液。可能引起皮肤刺激和烧伤。本产品的材料安全数据表可直接从人体诊断学处索取。
9. 化学品和制备或使用的试剂必须按照国家生物危害和安全指南或法规作为危险废物处理。
10. 以800转/分的速度使用定轨振荡器。
更多细节请咨询免费客服热线,我们将为您详细解答。