【前言简介】
由产碳青霉烯酶的革兰氏阴性杆菌(C-PGNB)引起的血液感染通常通过标准方法在16-72小时后检测到,导致治疗不当或初始治疗调整延迟,住院时间增加,并发症发生率增加和死亡率增加。一种新的程序,使用免疫层析横向流动抗菌素耐药性IVD检测已经被开发出来,可用于直接从阳性血培养瓶中检测C-PGNB。可以在任何微生物实验室进行,目的是缩短严重系统性感染患者中C-PGNB的检测和识别时间,从而辅助临床医生优化这些难以治疗的血流感染患者的管理。
【检测原理】
本试剂盒为即用型,可用于制备血培养,目的是对阳性血培养进行处理,以提高对细菌提取物上的碳青霉烯酶的检测。该试剂盒可与所有抗药性试剂盒一起用于分析临床血培养阳性的OXA-48、KPC、NDM、VIM和IMP碳青霉烯酶(未验证为OXA-163、OXA-23、OXA-40、OXA-58和CTX-M)。
【储存】
试剂盒的任何试剂都应储存在15-30℃(室温)下,可储存至有效期;开封后的瓶装试剂可稳定至有效期;避免冷冻试剂
注意:若红细胞裂解液中出现沉淀,则可在40℃下振荡15分钟
【样品收集及处理】
待检测的血培养标本应采用标准的微生物学方法来获得和处理。
检测和验证的血液培养瓶为: BD BactecTM或BACT/ALERT。
【准备工作】
在微量离心管上标记患者名字或标本编号
样品准备:
1)从阳性血培养瓶中收集1mL样本,并加入微量离心管中
2)加入10µL MS缓冲液,并在37℃下以300rpm振荡孵育15分钟
3)孵育后,加入200µL RBCL溶液,反复颠倒或涡旋混匀,并立即以13000g离心1分钟
4)弃去上清液,加入1mL洗涤缓冲液洗涤沉淀物,以13000g离心1分钟
5)弃去上清液,根据所使用的IVD测试,添加缓冲液,涡旋制剂以均质化
选择:
专门用于检测OXA-48和KPC阳性菌株的较短程序,不包括金属β-内酰胺酶(MBLs)
可省略MS缓冲液15分钟的孵育时间,直接执行第3步,用RBCL溶液处理样本
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