简要介绍
VEGF-A 转录被缺氧和癌基因如 H-ras 和几种跨膜酪氨酸激酶(如表皮生长因子受体和 ErbB2)高度激活。 与正常组织相比,这些途径共同解释了肿瘤中 VEGF-A 的显着上调,并且通常具有预后重要性和相关性。
检测原理
将抗小鼠 VEGF-A抗体包被在微孔板上。样品或标准品中存在的小鼠 VEGF-A与吸附在微孔中的抗体结合。孵育后,在洗涤步骤中去除未结合的生物成分,并添加生物素缀合的抗小鼠 VEGF-A抗体,并与第一抗体捕获的小鼠 VEGF-A结合。温育后,未结合的生物素缀合的抗小鼠 VEGF-A抗体在洗涤步骤中被去除。 添加链霉抗生物素蛋白HRP 并与生物素缀合的抗小鼠 VEGF-A抗体结合。孵育后,在洗涤步骤中去除未结合的链霉亲和素 HRP,并将与 HRP 反应的底物溶液添加到孔中。与样品或标准中存在的小鼠 VEGF-A的量成比例地形成有色产物。 通过添加酸终止反应并在 450 nm 处测量吸光度。 从 7 种小鼠 VEGF-A标准稀释液制备标准曲线并确定小鼠 VEGF-A样品浓度。
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