【前言简介】
利什曼原虫是锥虫科的原生动物。寄生虫以两种形式存在：媒介昆虫中肠中的前鞭毛虫和哺乳动物宿主中巨噬细胞吞噬溶酶体中的无鞭毛虫。在巨噬细胞中，它们生活为圆形的、不活动的无鞭毛体（直径3-7µm）。巨噬细胞在吸血期间被白蛉摄取，无鞭毛体被释放到它们的胃中。无鞭毛虫几乎立即转化为活动的细长（10-20µm）鞭毛前鞭毛虫，它们迁移到苍蝇的消化道，增殖后向前移动到昆虫的唾液腺。利什曼原虫是一种在全球范围内广泛存在的寄生虫病；“类型”是由被感染的巨噬细胞的主要位置决定的。在人类中有四种不同形式的利什曼病，具有广泛的临床表现；所有这些都可能有毁灭性的后果。利什曼病目前影响着88个国家的约1200万人，除16个国家外，其余都发生在发展中国家。据估计，3.5亿人面临不同种类利什曼原虫感染的风险；每年新病例的发病率约为200万（10-150万CL，50万VL）。内脏利什曼病（VL）是该疾病中最严重的一种形式，如果不加以治疗，其死亡率将接近100%。与许多其他热带病一样，利什曼病与经济发展和人为造成的环境变化有关，这增加了对白蛉病媒的接触。其地理分布受到白蛉分布的限制。艾滋病和其他免疫抑制条件增加了利什曼原虫感染者发展为内脏疾病（VL）的风险。利什曼原虫/艾滋病毒合并感染被认为是一种真正的“新发疾病”，特别是在西南欧，那里25-70%的成人VL病例与艾滋病毒感染有关，1.5- 9.5%的艾滋病病例是新获得或重新激活的VL。静脉注射吸毒者已被确定为主要的危险人群。
【检测原理】
特异性抗体的定性免疫酶学测定是基于ELISA（酶联免疫吸附试验）技术。微孔板上包被特定的抗原，以结合样品的相应抗体。洗涤微孔以去除所有未结合的样品材料后，添加酶联物，与捕获的抗体结合。在第二个洗涤步骤中，未结合的共轭物被去除。通过加入四甲基联苯胺(TMB)底物，得到蓝色反应产物，可以观察到结合结合物形成的免疫复合物。该产品的强度与样品中特异性抗体的数量成正比。加入终止液以终止反应，蓝色变成了黄色。使用酶标仪器读取450/620nm处的吸光度。
【试剂盒组成】
1）微孔板 12x8，包被婴儿利什曼原虫抗原
2）样品稀释液 1×100ml，磷酸盐缓冲液（10mM），pH 7.2 ± 0.2，即用型
3）终止液 1×15ml，硫酸，0.2mol/L，即用型
4）洗涤浓缩液 20倍浓缩，磷酸盐缓冲液（0.2M），1×50ml，pH 7.2 ± 0.2
5）酶联物 1×20ml，过氧化物酶标记的蛋白A，即用型
6）底物液 1×15ml，3,3’,5,5’-四甲基联苯胺（TMB），即用型
7）阳性质控 1×2ml，即用型
8）临界质控 1×3ml，即用型
9）阴性质控 1×2ml，即用型
10）封板纸 1x
11）使用说明书 1x
【所需的材料和设备】（未提供）
1）酶标仪
2）37℃培养箱
3）手动或自动洗板装置
4）移液器：10-1000µL
5）涡旋混合器
6）蒸馏水
7）一次性试管
【储存条件】
试剂盒必须储存于2-8℃的环境中，打开的试剂在标签上规定的有效期内是稳定的。
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