【乙脑病毒试剂盒简介】
感染日本脑炎病毒会引起包括脑炎等一系列症状。乙脑(JE)试剂盒使用了一种称为JERA的重组抗原,它可以作为日本脑炎病毒感染的血清学敏感标记物。JERA蛋白是由日本脑炎病毒抗原的不同部分的肽链构成的重组抗原。
【检测原理】
乙脑(JE)试剂盒是一酶促放大的“两步”法夹心酶免检测试剂。
在测试中,JE IgG阳性质控(代表有免疫活性或疑似有免疫活性的血清)、JE阴性质控(代表着无免疫活性的血清)与未知的样本血清在微孔板上孵育。血清样品用IgG的样品稀释液进行稀释。在孵育和洗板后,在微孔中加入对人IgG具有特异性的抗体(用辣根过氧酶标记此抗体)。第二次孵育和洗板后,再加入TMB底物液孵育。
注意:依据抗体反应的程度,血清应根据本试剂提供的“JE IgG血清稀释液”进行稀释。
之后,加入酸性终止液。在450nm处测定吸光率从而测定酶促底物反应的程度。当高于一定值时,JERA以及质控微孔的吸光度可精确的测定是否存在JEV抗体。
注意:阴性质控和阳性质控是作为内部质控而提供的其目的是监测试剂成分的完整性。
乙脑病毒检测试剂盒组成成分
JE ELISA试剂盒包含了足够用于96孔的试剂。此试剂盒包含的成分有:
JE IgM/IgG检测用的特定材料:
■JEV人IgM/IgG检测用微孔板:包被有抗人IgM/IgG抗体的96孔聚苯乙稀微孔板,在2-8℃下储存备用,包被了抗人IgM/IgG的微孔可用来捕获人样品中的IgM/IgG抗体。
■样品稀释液:25ml ,1瓶,2-8℃下贮存,即用。注意:如果稀释液出现沉淀,先旋涡混合再使用。
■JE 阳性质控:1支50μl热灭活灭活血清。JE IgM阳性质控用于辅助监测试剂的完整性。2-8℃下储存至使用。在使用前短暂地迅速摇匀试剂,以收集瓶底的成分。
■JE阴性质控:1支50μl热灭活血清,JE阴性质控用于辅助监测试剂的完整性,2-8℃下储存至使用。在使用前短暂地迅速摇匀试剂,以收集瓶底的成分。
注意:若需长时间储存(>1周)血清应分装储存在-70℃或-20℃。
■JE抗原(JERA):1支,3ml即用型的JERA,2-8℃下贮存,即用
■正常细胞抗原(NCA):1支,3ml即用型的JERA,2-8℃下贮存,即用
■10X的洗涤液:1瓶120ml,在整个过程的洗板步骤中120mL的洗涤液将被使用,在2-8℃下储存。
■Enwash:1瓶,20ml,Enwash在加酶联物后的洗板程序之间使用,在2-8℃下贮存备用。
■用于JE IgM检测的即用型 HRP酶标物:1瓶, 6ml,内含预稀释好的HRP黄热病毒活性单克隆抗体,在2-8℃下贮存备用。
注意该试剂任何时候都应该在避光条件下保存。
■TMB底物液: 1瓶,9ml,在2-8℃下贮存备用。
注意:底物液应时刻存放于试剂盒所提供的避光瓶里。
■ 终止液:1瓶6ml,用来终止酶反应,2-8℃下贮存备用。
警告:强酸;穿保护手套、面罩和戴安全眼镜,弃置所有材料均应按照安全条例与规则进行。