【前言简介】
烟曲霉是曲霉属的一种真菌,是最常见的引起疾病的曲霉种之一。烟曲霉菌是一种广泛存在于自然界的腐生生物,通常存在于土壤和腐烂的有机物中。真菌的菌落产生数千个的小分生孢子(2-3 μm),很容易通过空气传播。该真菌能够在50°C的温度下生长,分生孢子在70°C下存活。人类不断地接触到这些无性孢子,据估计,一个人每天吸入几百个分生孢子;通常这些物质会很快被免疫系统所消灭。曲霉菌病主要发生在免疫功能低下的个体中,无论是由于疾病还是由于免疫抑制药物,并且是急性白血病和造血干细胞移植中导致死亡的主要原因。曲霉菌病一词包括由曲霉属真菌引起的许多不同的疾病。最常见的形式是过敏性支气管肺曲霉菌病(ABPA)、肺曲霉菌瘤和侵袭性曲霉菌病(IA)。过敏性支气管肺曲霉菌病的特征是免疫系统对曲霉种类的过度反应。它发生在哮喘或囊性纤维化患者中。临床上,ABPA表现为支气管哮喘伴短暂的肺浸润,可发展为近端支气管扩张和肺纤维化。曲霉菌瘤,通常被称为“真菌球”,发生在由肺结核、结节病或其他大疱性肺疾病引起的现有肺腔内。这种真菌在一个洞里沉淀并生长,直到它形成一个紧凑的球体,其中包含了来自周围肺、粘液和其他碎片的死亡组织。患者通常无症状,且通常在偶然诊断前与曲霉菌瘤共存数十年。然而,它可能会引起咯血。侵袭性曲霉菌病是一种进展迅速、通常是致命的疾病,针对严重免疫功能低下的患者,包括白血病等血液系统恶性肿瘤患者,那些接受过实体器官或造血干细胞移植的患者,以及慢性肉芽肿性疾病或晚期艾滋病患者。IA的特点是侵犯血管,导致多灶性浸润。它可能会扩散到其他器官,特别是中枢神经系统。【检测原理】
特异性抗体的定性免疫酶学测定是基于ELISA(酶联免疫吸附试验)技术。微孔板上包被特定的抗原,以结合样品的相应抗体。洗涤微孔以去除所有未结合的样品材料后,添加酶联物,与捕获的抗体结合。在第二个洗涤步骤中,未结合的共轭物被去除。通过加入四甲基联苯胺(TMB)底物,得到蓝色反应产物,可以观察到结合结合物形成的免疫复合物。该产品的强度与样品中特异性抗体的数量成正比。加入终止液以终止反应,蓝色变成了黄色。使用酶标仪器读取450/620nm处的吸光度。
【试剂盒组成】
1)微孔板 12x8,包被烟曲霉菌抗原
2)样品稀释液 1×100ml,磷酸盐缓冲液(10mM),pH 7.2 ± 0.2,含抗人IgG(RF吸附剂),即用型
3)终止液 1×15ml,硫酸,0.2mol/L,即用型
4)洗涤浓缩液 20倍浓缩,磷酸盐缓冲液(0.2M),1×50ml,pH 7.2 ± 0.2
5)酶联物 1×20ml,过氧化物酶标记的人IgM抗体,即用型
6)底物液 1×15ml,3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB),即用型
7)阳性质控 1×2ml,即用型
8)临界质控 1×3ml,即用型
9)阴性质控 1×2ml,即用型
10)封板纸 1x
11)使用说明书 1x
【所需的材料和设备】(未提供)
1)酶标仪
2)37℃培养箱
3)手动或自动洗板装置
4)移液器:10-1000µL
5)涡旋混合器
6)蒸馏水
7)一次性试管
【储存条件】
试剂盒必须储存于2-8℃的环境中,打开的试剂在标签上规定的有效期内是稳定的。
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