背景说明:
TNF-α 高灵敏度 ELISA 是一种酶联免疫吸附试验,用于定量检测人 TNF-α。TNF-α 高灵敏度 ELISA 仅供研究使用。 不适用于诊断或治疗。
检测原理:
将抗人TNF-α抗体包被到微孔上。样品或标准品中存在的人 TNF-α 与吸附在微孔中的抗体结合。 添加生物素缀合的抗人TNF-α抗体,并与第一抗体捕获的人TNF-α结合。孵育后,未结合的生物素偶联的抗人 TNF-α 抗体在洗涤步骤中被去除。 添加链霉亲和素 HRP 并与生物素缀合的抗人 TNF-α 抗体结合。孵育后,未结合的链霉亲和素-HRP 在洗涤步骤中被去除,扩增试剂 I 添加到孔中。孵育后,在洗涤步骤中去除未结合的扩增试剂 I,并添加扩增试剂 II(链霉亲和素-HRP)。孵育后,在洗涤步骤中去除未结合的扩增试剂 II,并添加与 HRP 反应的底物溶液。有色产物的形成与样品或标准中存在的人 TNF-α 的量成比例。 通过添加酸终止反应并在 450 nm 处测量吸光度。 从 7 种人 TNF-α 标准稀释液和确定的人 TNF-α 样品浓度制备标准曲线。
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