【人类粒细胞无形体 的前言简介】
立克次体检测试剂盒于1994年有了新发现——人类粒细胞埃希氏菌病首先通过在外周血中性粒细胞中发现的特征性胞质内含物(桑椹胚)而得到认可。发现这些患者的血清反应对已知的兽医病原体马埃里希氏菌具有特异性。此后,包括马兜铃埃里希氏菌,吞噬埃希氏菌和HGA在内的基因组已被指定为吞噬嗜酸浆单胞菌。此IFA分析利用受感染和固定的人类细胞来检测针对这种病原体的特定人类抗体。
【立克次体检测的原理】
将疑有人类粒细胞无形体感染的患者血清在缓冲盐水中稀释,并在各个玻片孔中孵育,以使血清抗体与固相抗原反应。然后洗涤载玻片以除去未反应的血清蛋白,并加入DyLight 488标记的抗人IgG(结合物)。该结合物有时间与抗原-抗体复合物反应。洗涤载玻片以除去未反应的结合物。所产生的反应可以使用标准的荧光显微镜观察,其中阳性反应被视为感染细胞细胞质中清晰定义的苹果绿色荧光包裹体(桑椹胚)。与阳性质控的孔不同,阴性反应是红色计数的细胞或荧光。然后可以在更高的稀释度下对阳性反应进行重新测试,以确定最高的反应性稀释度或终点稀释度。
【立克次体检测试剂盒组成成分】
检测玻片 有被人类人粒细胞无形体分离株感染的固定THP-1细胞。
荧光标记物 含有亲和纯化的DyLight 488标记的山羊抗人IgG(重链),带复染剂。
阳性质控 含有以1:80的筛选稀释液提供的人阳性血清。终点滴度为1:640
阴性质控 含有人血清,以1:80的筛选稀释度。
封固剂 1ml
白盖滴瓶,含50%甘油的PBS
洗涤液 1L
将所提供的洗涤液加入到1L纯化水中,得最终PH7.2
【样本要求】
将疑有人类粒细胞无形体感染的患者的全血样品凝集,通过离心分离出血清样本。2-8℃下可保存5天,要保存更长时间需储存在-20℃环境下。严重的病人应该从疾病开始就采集样品,康复的样本应该间隔2~4周采集以观察滴度变化。