【前言简介】
蚤传斑疹伤寒属斑点发热组立克次体，在世界范围内被发现并且通常由蜱叮咬进行传播。然而，蚤传立克次体（Rickettsia felis）是一种罕见的斑点性发热立克次体，由跳蚤传播，也在世界各地被发现。
蚤传斑疹伤寒的病原体斑疹伤寒组立克次体由感染的跳蚤和虱子传播。该组包括莫氏立克次体（地方性斑疹伤寒）和普氏立克次体（流行性斑疹伤寒），这两种物种均在世界范围内发现。随后的感染诱导特异性抗体应答，其可被检测并用作鉴定受感染人的间接手段。
【检测原理】
蚤传斑疹伤寒IgG试剂盒中的IFA载玻片利用纯化的莫氏立克次体和蚤传立克次体作为每个载玻片孔内的单独底物抗原。将患者血清在吸附剂悬浮液中稀释至少1:64，并在各个载玻片孔中温育，以使血清抗体与立克次体反应。洗去未反应的血清蛋白并加入荧光结合物去标记抗原抗体复合物。温育之后再洗去未反应荧光结合物，结果可以使用标准荧光显微镜观察，其中阳性反应被看作是在红色背景下的背景内小的清晰可见的荧光棒状。阴性反应被认为是复染（红色）背景或荧光不同于阳性对照孔中所见的荧光。然后可以在更高的稀释度下重新测试阳性反应以确定最高的反应性或终点稀释度。
【实验步骤】
1、 将蚤传斑疹伤寒IgG试剂盒阳性质控稀释至系列倍比浓度，包含其中一份高于最大稀释滴度(1:512)，一份低于最大稀释滴度。
2、 对于每个血清稀释液，将10μL加入到一个载玻片孔中并记录该位置以供以后参考。对于每个测定，包括步骤1中制备的阳性对照和阳性对照的系列稀释。另外在一个孔中加入1滴阴性对照。
3、 在保湿盒中温育。
4、 用PBS慢慢冲洗载玻片孔，每次洗涤1排孔以避免混合样品。然后浸入装有PBS的容器中。
5、 将载玻片在蒸馏水中短暂浸泡并使其风干。
6、 加入酶联物，避光温育。
7、 加3-4滴封固剂于各片中并盖上盖玻片.
8、 显微镜下观察染色片并进行判定
【质控说明】
每次蚤传斑疹伤寒IgG试剂盒检测都要设阴性对照和稀释阳性对照。阴性对照显示阴性样本的显色情况，没有明显的立克次体体染色特征。阳性对照应该在1:256至1:1024之间有最大终点稀释（即4-16倍的瓶内阳性对照的稀释度）。1:512稀释度的荧光强度可以作为临界(Cut-off)进行判读。如果对照品的显色情况与上述描述不符，检测结果应视为无效。应该重新检查试剂组分和操作步骤。重新检测。
